求半定量PCR的详细步骤 要详细到每一步喔研究人员常常需要检测特定基因的表达水平，检测的手段很多，主要有Northern, 半定量RT-PCR, 荧光定量PCR(real time PCR),基因芯片的手段。很难用几行字来说清楚这些技术的优缺点。 Northern方式比较直观，但是难以批量进行，劳动量较大；半定量RT-PCR,被一些学员所推崇，因为很多实验室都可以做，但是半定量RT-PCR的关键要保证所有样品的可比性非常困难，内...
实时定量PCR的结果是怎样分析的？摘要】 目的 探讨实时荧光定量PCR不同结果分析模式对检测结果的影响。方法 用LineGene FQD33A型荧光定量PCR检测系统检测本院门诊和病房乙肝病人血清HBV DNA 77份，分别用最大二阶导数法和样点拟合法进行结果分析。结果 发现两种分析方法的总体相关性较好（r= 0.978）。 但HBV DNA拷贝数含量＜105时， 两种模式的相关性差（r= 0.706），此时，最大二阶导数法得出的...
实时定量PCR的结果分析Sybergreen可以和所有核酸结合，没有特异性。所以要保证特异性的话，最好用其他的方法。扩增体系中加入模板DNA的体积，比如同时10微升的体系，对照组加1微升DNA，实验组加2微升DNA，则实验组的加样量是对照组的2倍。看CT值是分析荧光定量PCR最直观的一个数据，CT值一般在35左右就失去参考价值了，平时我们实验室用BIODAI-PCR荧光定量法测得的扩增曲线的起跳值基本在30左右实时荧光定量PCR与普通P...
定量PCR的质量评价RNA 定量的程序很多， 比较用了Ribogree,Agilent BioAnalyser,spectrophotometer,Nanodrop and the BioRad Experion 来定量同样的样品。结果显示没有哪两种方法得到同样的分析数据。所以用不同的方法进行定量是不明智的。因此，我们需要用统一套定量分析方法来完成所有RNA样品的评价。 RNA 质量 RNA 质量主要包括RNA的纯度（没有蛋白质和DNA...