淀粉酶DNS法对食用菌发酵液淀粉酶活力的测定

DNS法对食用菌发酵液淀粉酶活力的测定

摘要选取广泛栽培的著名食用菌香菇、平菇和姬菇菌丝体为研究菌种采用3 5-二硝基水杨酸DNS比色法检测供试食用菌的淀粉酶产生能力。以2%可溶性淀粉为唯一碳源的查氏液体培养基诱导发酵供试食用菌产生的淀粉酶活力在1.513~3.417U/mL为食用菌工业发酵菌种的选育提供了参考依据和分析方法。

AbstractEnzyme energy o f amylase from edib le fungi was determinated b ased on

3 5-dinitryl-salicyle DNS .Taking czapek as induction medtum in whith the onlycarbon source was 2%soluble starch and amylase energy ranged from 1.513 to 3.417U/mL among Lentinula edodes Pleurotus ostreatusPleurotus cornucopiae so as toput forward a reference and analysis method for the edible fungistrain selection.

Key wordsedib le fungi fermention DNS amylase activity determination

经过人工驯化培养的食用真菌的菌丝体可以栽培扭结成食药用价值很高的子实体。近年来人们发现食用真菌菌丝体也可以仿效青霉菌发酵大规模生产食用菌多糖、抗生素、 酶制剂等亟待研发的生物活性物质[1]。食用菌发酵有赖于适宜的工艺条件与生物反应器但更取决于具工业开发价值的生产菌种的生理性状其中包括食用菌生产菌种对环境的适应性归结为食用菌的代谢能力能够利用廉价原料迅速生长并大量合成目的产物。许多工业发酵菌种不能直接利用淀粉生物工厂必须对原材料进行预处理通过液化、糖化生产微生物可以直接利用的淀粉水解糖。如果选育出具有淀粉酶活力的生产菌种就可以实现边糖化边发酵可极大地提高生产效率。因此探讨灵敏而准确的食用菌淀粉酶活力的测定技术具有重要的生理学意义和实践应用潜力。

淀粉酶活性测定方法较多[2]但大致分为4类一是测定底物淀粉的消耗量有粘度法、浊度法和碘—淀粉比色法等二是生糖法测定产物葡萄糖的生成量三是色原底物分解法 四是酶偶联法。利用3 5-二硝基水杨酸DNS比色法测定还原糖含量来反映淀粉酶活力是目前较常采用的方法。此法是用比色法测定淀粉酶作用于淀粉后生成的还原糖的量以单位重量样品在一定时间内生成的麦芽糖的量表示酶活力。该方法测试所用试剂易得溶液有效期长且测试精确度高结果比较可靠。故笔者采用此法来测定供试食用菌产生淀粉酶的活力[3-5]。

1材料与方法

1.1供试材料

香菇Lentinula edodes 、平菇Pleurotus ostreatus和姬菇Pleurotus