keyclone单克隆抗体是何物?

keyclone  时间:2022-02-02  阅读:()

单克隆抗体是由什么细胞产生

1975年分子生物学家G.J.F.克勒和C.米尔斯坦在自然杂交技术的基础上,创建立杂交瘤技术,他们把可在体外培养和大量增殖的小鼠骨髓瘤细胞与经抗原免疫后的纯系小鼠脾细胞融合,成为杂交细胞系,既具有瘤细胞易于在体外无限增殖的特性,又具有抗体形成细胞的合成和分泌特异性抗体的特点。将这种杂交瘤作单个细胞培养,可形成单细胞系,即单克隆。利用培养或小鼠腹腔接种的方法,便能得到大量的、高浓度的、非常均一的抗体,其结构、氨基酸顺序、特异性等都是一致的,而且在培养过程中,只要没有变异,不同时间所分泌的抗体都能保持同样的结构与机能。这种单克隆抗体是用其他方法所不能得到的。 这项新技术从根本上解决了在抗体制备中长期存在的特异性和可重复性问题,可用于探讨①蛋白质的精细结构;②淋巴细胞亚群的表面新抗原;③组织相容性抗原;④激素和药物的放射免疫(或酶免疫)分析;⑤肿瘤的定位和分类;⑥纯化微生物和寄生虫抗原;⑦免疫治疗和与药物结合的免疫-化学疗法 (“导弹”疗法,利用单克隆抗体与靶细胞特异性结合,将药物带至病灶部位。因此,单克隆抗体可直接用于人类疾病的诊断、预防、治疗以及免疫机制的研究,为人类恶性肿瘤的免疫诊断与免疫治疗开辟了广阔前景。

单克隆抗体是何物?

单克隆抗体(Monoclonal Antibody,McAb)即单个B淋巴细胞克隆所分泌的抗体。 抗体主要由机体的B淋巴细胞合成,每个B淋巴细胞有合成一种抗体的遗传基因。当机体受抗原刺激时,抗原分子上的许多决定簇分别激活各个具有不同基因的B细胞。被激活的B细胞分裂增殖形成该细胞的子孙,即克隆。如果选出一个合成一种抗体的细胞进行培养,就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群,即单克隆。单克隆细胞所合成的抗体即为单克隆抗体。 1975年Kohler和Milstein首先报道,用细胞杂交技术,使经绵羊红细胞(SRBC)免疫的小鼠脾细胞,与小鼠骨髓瘤细胞融合,创建了第一个B细胞杂交瘤细胞株,获得了抗SRBC的单克隆抗体。这是免疫学,乃至医学史上的一个里程碑。 单克隆抗体的特点是:理化性状高度均一、生物活性单一、与抗原结合的特异性强、便于人为处理和质量控制,并且来源容易。这些优点使它一问世就受到高度重视,并成为解决生物学和医学等许多重大问题的重要手段。 补充:医生的“生物武器” 一提到“生物武器”,人们或许会想到。“细菌战”。是的,用病菌或细菌产生的毒素伤害人、畜的战争叫“细菌战”,所用的病菌及其携带者、细菌毒素等则称为“生物武器”或“细菌武器”。但在这里我们讲的医生的生物武器是指用当代分子生物学、细胞学、免疫学等理论与技术所建立的用于疾病诊断以及治疗的最新手段,这些手段代表了医学发展新水平以及今后发展的新方向之一。 生物导弹 导弹指的是可以依*控制系统制导的,能十分准确地击中预定目标的高速飞行武器。导弹的种类很多,如地对空、空对空导弹等,这些都是用于真正的战争的。我们这里讲的是用于找出疾病或是治疗疾病,尤其是癌症的医学诊治药物或方法,这便是“生物导弹”,或称为“单克隆抗体”。 那么什么是“单克隆抗体”呢?为什么又称它为“生物导弹”?原来我们人体中存在有一种十分有用的“健康卫士”,它称为B淋巴细胞。当外来细菌、病毒、或是异性物质侵入我们人体时,它们便立即产生一种对抗这些细菌、病毒或异性物质的“抗体”。抗体可把它们溶解或杀灭。正是由于抗体有这种功能,科学家们便想出了一种“细胞杂交”的方法,使这种抗体可以源源不断地产生。什么是“细胞杂交”、它又为什么可不断产生抗体呢?顾名思义,“细胞杂交”就是用两种不同的细胞将它们融合成一种细胞。为了制造特异性的抗体,科学家们将B淋巴细胞与一种瘤细胞融合在一起,于是所产生的“杂交细胞”一方面具有瘤细胞不断生长繁殖的性质(科学家们称之为“永生不死性”),一方面又有B细胞产生专一抗体的性质。科学家们再将这种杂交细胞所产生的抗体提纯出来,这便是单克隆抗体了。 由于单克隆抗体是B细胞针对某一细菌、或某一特殊癌细胞而产生的,因此它就会像“导弹”一样只跟踪激发B细胞产生抗体的目标(或为细菌、癌细胞等),而不会伤及“无辜”的其他细胞。另外,为了使我们能看到单克隆抗体与目标(如癌细胞)的结合,以便医生作出准确诊断,科学家们让单克隆抗体与可以显示的物质结合在一起,如荧光素、放射性核素等,这样医生们便知道疾病(如癌症)的部位、大小等。若是将单克隆抗体与抗癌药物、毒素等结合在一起,然后将这种结合用于人体,那么单克隆抗体就会追踪目标,并且将抗癌药物或毒物带到癌症部位,将癌细胞杀死。 目前单克隆抗体在医疗中正起着巨大的作用,然而也还存在着一些问题。例如由于提纯很困难,有时难免带有杂质,这样诊断与治疗效果便不会太好,此外,癌细胞等坏家伙还会发生“变异”,就像孙悟空七十二变那样,让你不认识它,这样单克隆抗体也就会找不到目标了。最后,外来入侵者如细菌、病毒及癌细胞还会产生“抗抗体”来中和单克隆抗体,就如“反导弹”一样来对付“导弹”。如何克服这些难题,还需要经过人们长期不懈的努力。 基因探针诊断技术与基因治疗 汉弗莱是美国1963~1969年的副总统。1967年他发现尿血(小便中有血液),医生用膀胱镜检查,诊断为“慢性增生性膀胱炎”,就是说不是癌症。不幸地是10年后他再检查时已确诊为“浸润性膀胱癌”了,就是说癌症已到了晚期,最终不治而谢世。 时隔十几年后的今天,美国新一代的医生将汉弗莱当年尿细胞标本,以及活组织标本和手术后的肿瘤标本再用一种最新的技术检查,发现这些标本中都存在一种称之为P53基因的突变,从而证实汉弗莱早在第一次尿血时已罹患膀胱癌了。那么为什么当年诊断不出汉弗莱生膀胱癌呢?原因就是那时还没有一种先进的称之为“聚合酶链反应”(简称为PCR)技术。 在我们人体细胞中至少存在有两种与癌症发生、发展密切相关的脱氧核糖核酸(即DNA)片段,即癌症相关基因。其中之一是导致肿瘤形成的“癌基因”,另一种是抑制肿瘤发生与发展的“肿瘤抑制基因”,平时人们称为“抑癌基因”或“抗癌基因”。如果细胞中癌基因过分活跃了,或是抑癌基因“丢失”了或某种原因而失去功能了,细胞便会恶变成癌。迄今科学家们已发现一百多个癌基因与十几个抑癌基因,其中一个称为P53的抗癌基因引起医生们的特别重视,原因是它的失活或突变与50%的人类肿瘤发生有关,其中包括肺癌、乳腺癌、膀胱癌、结肠癌等。PCR法主要原理是将癌细胞中DNA提取出来,再让它扩增,再通过与已知的探针杂交进行分析便知道被检查的细胞DNA有否异常了。因此,PCR法可以在细胞发生明显的形态改变之前便知道它是否恶变。 除了基因诊断外,基因治疗目前也正成为医生们治疗疾病的一种最新武器。 数年前美国有位小姑娘生了一种被称为“先天性腺苷脱氨酶缺陷病”,这种病人抵抗力是极为低下的,外来的致病因子如病菌、病毒等极易侵袭病人的机体而致使病人死亡。于是这位小姑娘接受了基因治疗。其方法是将病人体内的白细胞抽吸出来,在科学家的实验室里培养,然后将正常的腺苷脱氨酶基因导入白细胞,最后再将这种带有正常腺苷脱氨酶基因的细胞输回小姑娘体内。经治疗后不久,这位小姑娘不但完全正常,而且可以滑冰、舞蹈了。 基因治疗有两条途径,其一是生殖细胞的基因治疗。这是将正常基因导入遗传病患者的生殖细胞内。目前最常用的方法是微注射法。即在显微镜下,用一支很细很细的玻璃针将正常的遗传基因注入到受精卵内。目前这种方法在动物实验中已取得极大成功,甚至可产生有新特性的品系动物。但这种途径在人类还不成熟,因为还要考虑到许多复杂的伦理问题。 另一种方法就是体细胞的基因疗法。它是将正常基因导入患有遗传性疾病患者的体细胞内(如上述那样腺苷脱氨酶患者的白细胞),治疗患者的遗传缺陷。 尽管基因治疗目前还存在许多问题,但它代表了“根治”疾病的一种方向。今后需要人们努力去解决的问题是导入的基因要正确地插入受体细胞基因组的某一位置上,不然地话要么不起作用,要么会使插入部位相邻的基因受到影响,反而产生不良作用。此外,外来基因虽然插入进去了,但它是否会有功能,即科学家讲的它是否能“表达”,就是说它是否能“指导”细胞产生我们所期望的蛋白质,从而起到治疗疾病的目的?还有,即使外来基因插入到受体细胞中了,它会不会又“掉出来”?这是科学家们又一担心的问题,就是它“是否能稳定地整合”。

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