Moeljopawiro雅虎免费邮箱

ISSN1907-985047UJITOKSISITASEKSTRAKDAUNWARU(HibiscustiliaceusL.
)TERHADAPLARVAArtemiasalinaLeachSERTAIDENTIFIKASIGOLONGANSENYAWANYANiLuhRustini,KomangAriati,A.
A.
IndahPurnaDewi,danIMadeDiraSwantaraJurusanKimiaFMIPAUniversitasUdayana,BukitJimbaran,BaliEmail:rustini.
niluh@yahoo.
co.
idABSTRAKUjitoksisitasmetodeBrineShrimpLethalityTest(BSLT)merupakanujipendahuluanyangdigunakanuntukmemantausenyawabioaktifdaribahanalamisebagaiantikanker.
Penelitianinibertujuanuntukmengetahuigolongansenyawatoksikdariisolatdaunwaru(HibiscustiliaceusL.
).
Maserasi900gserbukdaunwarudengan7000mLetanol(5x24jam)menghasilkanekstrakpekatetanolsebanyak53,19gdenganhasilujitoksisitasterhadaplarvaArtemiasalinaLeachLC50=79,43ppm.
Ekstraketanoldipartisimenghasilakan1,81gekstrakn-heksana(LC50=63,09ppm),1,52gekstrakkloroform(LC50=1000ppm)dan50,08gekstrakair(LC50=316ppm).
Ekstrakn-heksanabersifatpalingtoksikselanjutnyadipisahkan,dimurnikandandiidentifikasi.
Pemisahanekstrakn-heksanasecarakromatografikolomdenganfasediamsilikagel60danfasegerakn-heksana-kloroform-etanol(5:4:1)menghasilkan7fraksi.
Fraksisatu(F1)dengannodatunggalpadakromatografilapistipisbersifatpalingtoksik(LC50=398ppm).
Identifikasifraksisatu(F1)denganujifitokimia,spektrofotometerUV-VisdanspektrofotometerIRdidugamengandungsenyawagolongansteroidkelompoksterol.
Katakunci:daunwaru,HibiscustiliaceusL.
,toksisitas,ArtemiasalinaLeachABSTRACTThe"BrineShrimpLethalityTest"(BSLT)isapreliminarytestusedtomonitorthebioactivecompoundsfromnaturalproductsasanti-cancer.
Thisresearchaimedtodetermineoftoxiccompoundsintheleafofwaru(HibiscustiliaceusL.
).
Macerationof900gwaruleafpowderwith7000mLofethanol(5x24hours)yielded53,19gethanolextractwithtoxicityteststolarvaeofArtemiasalinaLeach(LC50)of79.
43.
Theethanolextractwaspartitionedtoyield1,81gofn-hexane(LC50=63,09ppm),1,52gofchloroform(LC50=1000ppm)and50,08gofaqueousextract(LC50=316ppm).
Themosttoxic,n-hexaneextract,wasthenseparated,purifiedandidentified.
n-hexaneextractwasseparatedbycolumnchromatographywithsilicagel60asstationaryphaseandn-hexane-chloroform-ethanol(5:4:1)asmobilephasetoyield7fractions.
Fractionone(F1)withasinglestainonthin-layerchromatographywasthemosttoxic(LC50=398ppm).
Identificationwithphytochemicaltest,UV-VisspectrophotometerandIRspectrophotometer,showedthattheisolatecontainedsterolcompounds.
Keywords:leafofwaru,HibiscustiliaceusL.
,toxicity,ArtemiasalinaLeachPENDAHULUANBermacam-macamjenispenyakitkianharikianbermunculandengantingkatkeganasanyangberbedadancenderungmeningkat,salahsatunyayaitupenyakitkanker.
Penyakitkankermenempatiperingkattertinggipenyebabkematiandidunia,khususnyadiNegaraberkembang(Andersonetal.
,2001;Indrayani,2006).
Usahasepertipembedahan,radioterapidankemoterapisitostatiktelahdilakukanuntukmenanggulangipenyakitini,namuntidaksedikitusahatersebutjustrumenimbulkanefeksamping(Moeljopawiro,2007).
KondisisepertiinimenuntutadanyacaraalternatifyangamanuntukpengobatankankerdenganefekJURNALKIMIA9(1),JANUARI2015:47-5248sampingyangdapatdiminimalkansepertipenggunaanbahanalamitumbuhan.
DiBali,penggunaantumbuhansebagaiobattradisionaltelahlamadipercayai.
MasyarakatBalimenggunkantumbuhansebagaiobatberlandaskanpadanaskahlontarusada(Nala,1993).
TumbuhanwarumerupakansalahsatujenistumbuhandalamUsadaTaruPermanayangmengandungkhasiatobat.
TumbuhanwaruyangtermasukdalamsukuMalvaceaedenganmargaHibiscus(Lawrence,1964;BackerdanBackhuizen,1968)digunakandalamberbagaipengobatan.
DaunwarudapatdigunakanuntukmengobatiTBparu-paru,batuk,sesaknapas,radangamandel(tonsillitis),demam,disentripadaanak,muntahdarah,radangusus,bisul,abses,danrambutrontok(Indahdandarwati,2013).
Daunwarumengandungsenyawapolifenol,saponindanflavonoid.
Akarwarumengandungsenyawatanin,saponin,danflavonoid(Kumaretal.
,2008).
Kulitbatangwarumengandungsenyawahibiscusamide,N-transferuloyltiramine,danN-cisferuloyltiraminedanbersifattoksikpadaselkankerkolonHT-29denganLC50<4μg/mL(Chenetal.
,2006).
Daunwarudidugadapatmemilikiaktivitassebagaiantikankerkarenasecarakemotaksonomisenyawaturunandapatterdistribusikeseluruhbagiantumbuhan.
HasilujitoksisitasekstraketanoldaunwarumenghasilkannilaiLC5079,43ppm,sehinggaperludilakukanpenelitianlebihlanjutdalamprosespencariankomponenbioaktifyangberpotensisebagaiantikanker.
MATERIDANMETODEBahanBahanyangdigunakanyaitudaunwaru(HibiscustiliaceusL.
)denganbioindikatoruntukujitoksisitasyaitularvaArtemiasalinaLeach,etanol,kloroform,n-heksana,silikagelGF254,silikagel60,tween80,aquades,airlautdengansalinitas32,3882g/1000mL,HClpekat,FeCl3,pereaksiwillstater,pereaksiBateSmith-Metacalfe,pereaksiMeyer,pereaksiWagner,pereaksiDragendroffdanpereaksiLiberman-Bruchard.
PeralatanAlatyangdigunakanyaituseperangkatalatgelas,pisau,blender,penguapputarvakum(vacuumrotaryevaporator)BUCHIVacumPumpV-700,neracaanalitik,bakkaca,batangpengaduk,pipetvolume,pipettetes,pipetmikro,kertassaring,alumuniumfoil,corongpisah,seperangkatalatKLT,seperangkatalatkromatografikolom,spektrofotometerUV-Visdoublebeamshimadzu/UV1800danspektrofotometerIRsimadzu/IRPrestige-21.
CaraKerjaSerbukdaunwaru(900g)dimaserasidenganetanolhinggadiperolehekstrakpekatetanoldandiujitoksisitasnya.
Ekstraketanoldilarutkanpadacampuranetanol:air(7:3)kemudiandifraksionasi(partisi)denganpelarutn-heksanadankloroform,sehinggadiperolehtigaekstrakpekat(ekstrakpekatn-heksana,kloroform,danair).
Ketigaekstrakkemudiandiujitoksisitasnyadanekstrakyangpalingtoksikdilanjutkanpadatahappemisahandanpemurnian.
Ekstrakpalingtoksikdipisahkandengankromatografikolomdenganfasediamsilikagel60danfasegerakn-heksana-kloroform-etanol(5:4:1)menghasilkanbeberapakelompokfraksi.
Fraksidenganpolapemisahanyangsamadiujitoksisitasnyadanisolatpalingtoksikdiidentifikasimenggunakanujifitokimia,spektrofotometerIR,danspektrofotometerUV-Vis.
HASILDANPEMBAHASANEkstraksiHasilekstraksi900gserbukdaunwarudengan7000mLetanol(3x24jam)diperolehekstrakpekatetanolsebanyak53,19gdengannilaiLC50sebesar79,43ppm.
Fraksionasiterhadap53,19gekstrakpekatetanolmenghasilkan1,81gekstrakn-heksana,1,52gekstrakkloroformdan50,08gekstrakair.
HasilujitoksisitassepertipadaTabel1menunjukkanekstrakn-heksanabersifatpalingtoksiksehinggadilanjutkanpadaprosespemisahandanpemurnian.
ISSN1907-985049Tabel1.
Hasilujitoksisitasfraksin-heksana,kloroformdanairterhadaplarvaArtemiasalinaLeachFraksiKonsentrasi(ppm)Jumlahlarvayangmati%MortalitasLC50(ppm)123Ekstrakpekatn-heksana0000063,091022313,7210044548,79100099892,01Ekstrakpekatkloroform000001000101227,7810032324,95100054454,02Ekstrakpekatair00000316102229,3810043332,01100056565,01Tabel2.
HasilujitoksisitasfraksiF1-F7terhadaplarvaArtemiasalinaLeachFraksiKonsentrasi(ppm)Jumlahlarvayangmati%MortalitasLC50(ppm)123F100000398102127,4410033428,82100054565,29F20000063095101001,271002119,40100032335,24F3000007,9x1025100000100000010000116,60F400000199526100011,231001117,39100023232,33F500000398107170551000001000101,76100011216,08F60000063095734,4481000001000113,60100012221,78F7000007,9x1025100000100000010000116,60JURNALKIMIA9(1),JANUARI2015:47-5250Tabel3.
HasilujifitokimiaNoUjifitokimiauntuksenyawaPereaksiPerubahanwarnaKesimpulan1FlavonoidNaOH10%WilstaterBateSmith-MetacalfeTidakadaperubahanTidakadaperubahanTidakadaperubahan---2SaponinAirpanas(dikocok)Tidakadabusa-3FenolikFeCl3Tidakadaperubahan-4AlkaloidDragendrorffMeyerWagnerTidakadaendapanTidakadaendapanTidakadaendapan---5Steroid/triterpenoidLieberman-BurchardBirukehijauan+(steroid)Gambar1.
SpektrumInframerahFraksiF1PemisahandanPemurnianHasilpemisahan1,5gekstrakn-heksanamenghasilkantujuhkelompokfraksi(F1-F7)sepertipadaTabel2danhanyafraksiF1dengannodatunggalbersifattoksikdengannilaiLC50398ppm.
IdentifikasiIsolatF1selanjutnyadiujifitokimia,dandiidentifikasidenganspektrofotometerIRdanspektrofotometerUV-Vis.
HasilujifitokimiasepertipadaTabel3menunjukkanisolatmengandungsenyawasteroid.
HasilanalisisisolatdenganspektrofotometerIR(Gambar1)menunjukkanserapanmelebarpadadaerahbilangangelombang3429,43cm-1didugaadalahvibrasiulurgugusOHberikatanhidrogenyangberasaldarialkohol.
Dugaaninidiperkuatdenganadanyaserapanpadadaerahsidikjaribilangangelombang1020,34cm-1dan1097,50cm-1karenavibrasitekukdariC-Oalkohol.
Serapanpadadaerah2958,80cm-1,2922,16cm-1dan2922,16cm-1didugadisebabkanolehvibrasiulurdariC-Halifatik,yangdiperkuatdenganmunculnyaserapanpadadaerahsidikjaribilangangelombang1460,11cm-1dan1261,45cm-1sertaserapankuatpada800,46karenavibrasitekukC-Halifatikkeluarbidangdaricincinyangbukanaromatis.
Serapanpadadaerah1629,85cm-1merupakanvibrasiulurdarigugusC=CyangtidakISSN1907-985051terkonjugasi,didukungdenganmunculnyaserapanpadadaerahsidikjari900cm-1karenavibrasitekukdariC-Hikatanrangkappadacincin(Silverstainetal.
,1981;GoadandAkihisa,1997).
HasilidentifikasidenganspektrofotometerinframerahinimenunjukanbahwaisolatkemungkinanmengandunggugusfungsiO-H,C-Halifatik,sertaC=Califatikyangtidakterkonjugasi,dangugusfungsiinijugadimilikiolehsenyawagolongansteroidkelompoksterol.
Jadi,isolatdaunwarukemungkinanmengandungsenyawagolongansteroidkelompoksterol.
Gambar2.
SpektrumUV-VisFraksiF1Hasilanalisisisolatdenganspektro-fotometerUV-Vis(Gambar2)menghasilkantigaserapanutamayangmunculpadapanjanggelombang269;409dan669nm.
Serapanyangterjadipadapanjanggelombang269nmkemungkinandisebabkanolehterjadinyatransisielektronikσ→σ*yangdidugaserapandariC-H.
Serapanpadapanjanggelombang409nmkemungkinandisebabkanterjadinyatransisielektronikπ→π*yangdidugadarisuatukromoforC=C.
Serapanpadapanjanggelombang669kemungkinandisebabkanterjadinyatransisielektronikn→σ*yangdidugadarisuatuauksokromO-Hyangmempunyaielektronnonbonding.
(Silverstainetal.
,1981;Sastrohamidjojo,1991;GandjardanRohman,2012).
SIMPULANDANSARANSimpulanIsolatF1daunwaruberifattoksikterhadaplarvaArtemiasalinaLeachdengannilaiLC50sebesar398ppm.
Hasilidentifikasidenganujifitokimia,spektrofotometerIRdanspektrofotometerUV-Vis,isolatdaunwarumengandungsenyawagolongansteroidkelompoksteroldengankemungkinangugusfungsiO-H,C-Halifatik,sertaC=Califatikyangtidakterkonjugasi.
SaranPenelitianlebihlanjutperludilakukanuntukmengetahuistrukturdanletakgugus-gugusfungsidarisenyawasteroidkelompoksteroltersebutdenganmenggunakanspektrofotometerNMR1H,NMR13C,spektrofotometermassasertapenelitianlebihlanjuttentangbioaktivitaslanjutansenyawa-senyawaantikanker.
UCAPANTERIMAKASIHPadakesempatanini,penulismenyampaikanterimakasihbanyakkepadasemuapihakyangturutsertamembantudalamprosespenyelesaianpenelitianini.
DAFTARPUSTAKAAnderson,J.
E.
,Goetz,C.
M.
,McLaughlin,J.
L.
,andSuffness,M.
,1991,ABlindComparisonofSimpleBench-topBioassaysandHumanTumourCellCytotoxicitiesasAntitumorPrescreens,PhytochemAnalysis,(2):107-111Backer,TC.
A.
andR.
C.
BakhuizenVanDenBrink,1968,FloraofJavaI,III,Wolters-NoordhoffN.
V.
Groningen,TheNetherlansChen,J.
J.
,HuangSY,DuhCY,ChenIS,WangTC,andFangHY,2006,AnewcytotoxicAmidefromthestemwoodofHibiscustiliaceus,PlantaMed,72(10):935-938Gandjar,I.
G.
danRohman,A.
,2012,AnalisisObatsecaraSpektrofotometridanJURNALKIMIA9(1),JANUARI2015:47-5252Kromatografi,cetakanI,PustakaPelajar,YogyakartaGoad,L.
J.
andAkihisa,T.
,1997,AnalysisOfSterols,Firstedition,BlackieAcademic&Professional,animprintofChapman&Hall,2-6BoundaryRow,LondonSE18HN,UKIndahS.
Y.
danDarwati,2013,KeajaibanDaunTumpasTuntasPenyakitKanker,Diabetes,Ginjal,Hepatitis,Kolesterol,Jantung,GrahaPustaka,Jakarta,h.
60Indrayani,L.
,S.
Hartati,danS.
Lydia,2006,SkriningFitokimiadanUjiToksisitasEkstrakDaunPecutKuda(StachytarphetajamaicensisL.
Vahl)TerhadapLarvaUdangArtemiasalinaLeach,BerkasPenelitianHayati,(12):57-61Kumar,S.
,Kumar,D.
,andPrakash,O.
,2008,EvaluationofAntioxidantPotential,PhenolicandFlavanoidContentsofHibiscustiliaceusFlowers,ElectronicJournalofEnvironmental,AgriculturalandfoodChemistry,7(4):2863-2871Lawrence,G.
H.
M.
,1964,TaxonomyofVascularPlants,TheMacmillanCompany,NewYorkMoeljopawiro,S.
,M.
R.
Anggelia.
D,Ayuningtyas,B.
,Widaryanti,Y.
,Sari,danI.
M.
Budi,2007,PengaruhSariBuahMerah(PandanusconoideusLam.
)TerhadapPertumbuhanSelKankerPayudaradanSelkankerUsusBesar,BerkalaIlmiahBiologi,6(2):121-130Nala,N.
,1993,UsadaBali,PT.
UpadaSastra,Denpasar